Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Popis
Kat. číslo: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix je multiplexní kvantitativní PCR kit založený na RNA jako templátu.V experimentu se reverzní transkripce a kvantitativní PCR provádějí ve stejné reakční zkumavce, což zjednodušuje experimentální operaci a snižuje riziko kontaminace.Jedinečný design směsi pufru a enzymů lze použít v jednokrokovém lyofilizovaném systému.Souprava využívá tepelně odolnou reverzní transkriptázu pro účinnou syntézu prvního vlákna cDNA pomocí hotstart Taq DNA polymerázy pro kvantitativní amplifikaci.Obsahuje optimalizovaný reakční pufr, směs enzymů atd. a byly přidány faktory, které účinně inhibují nespecifickou PCR amplifikaci a zvyšují účinnost amplifikace více reakcí qPCR, což umožňuje mnohonásobnou fluorescenční kvantitativní amplifikaci při zajištění účinnosti amplifikace primerů.
Komponenty
| název |
| 1. Lyo-pufr |
| 2. Směs lyo-enzymů |
| 3. Lyo ochranný prostředek |
Přepravní podmínkyion
A: Lyo-pufr a ochranný prostředek: -25~-15℃, skladovatelnost je 1 rok.
B: Lyoenzymová směs, 2-8 ℃, skladovatelnost je 6 měsíců.
Návod k obsluze
1. Reakční systém (Vezměte si 25μL jako příklad)
| Komponenty | Objem (μL) | Závěrečné soustředění |
| Lyo-Buffer | 6 | 1* |
| Lyo-enzymová směs | 1 | - |
| Lyo-Protectant | 8 | - |
| Primer Mix (10μM) | 1 | 0,1-1 uM |
| Směs sondy (10μM) | 0,5 | 0,05-0,5uM |
| Šablona RNA | 5 | - |
| DEPC H2O | Až do 25 | - |
2. Optimalizovaný cyklistický protokol
1) Standardní cyklistický protokol
| Reakční fáze | Teplota | Čas | Cyklus | |
| 1 | Reverzní transkripce | 50 °Ca | 10 min | 1 |
| 2 | Počáteční denaturace | 95 °C | 5 minut | 1 |
| 3 | Amplifikační reakce | 95 °C | 15 sekund | 45 cyklů |
| 60 °Cb | 30 sekundc |
2) Protokol rychlého cyklování
|
| Reakční fáze | Teplota | Čas | Cyklus |
| 1 | Reverzní transkripce | 50 °Ca | 2 min | 1 |
| 2 | Počáteční denaturace | 95 °C | 2 sekundy | 1 |
| 3 | Amplifikační reakce | 95 °C | 1 sec |
45 cyklů |
| 60 °Cb | 13 sekundc |
Poznámka:
a) Zvrátit transkripce: Teplotu lze zvolit 42°C nebo 50°C po dobu 10-15 minut.
b) Amplifikační reakce: Teplota se upravuje podle hodnoty Tm navržených primerů.
C)Fluorescence signál získávání: Nastavte prosím experimentální postup podle požadavkůnávod k přístroji.
Technické informace/Specifikace
| Hot Start | Vestavěný horký start |
| Metoda detekce | Detekce primer-sonda |
| PCR metoda | Jednokroková RT-qPCR |
| Typ vzorku | RNA |
Poznámky
1. Tento produkt je určen pouze pro výzkumné účely.
2. Používejte prosím nezbytné OOP, jako je laboratorní plášť a rukavice, abyste zajistili své zdraví a bezpečnost！
