Peroxidáza (zdroj křenu) Synonymum: Oxidoreduktáza peroxidu vodíku;HRP

Křenová peroxidáza (HRP) se izoluje z kořenů křenu (Amoracia rusticana) a patří do ferroprotoporfyrinové skupiny peroxidáz.HRP se snadno slučuje s peroxidem vodíku (H2O2).Výsledný komplex [HRP-H2O2] může oxidovat širokou škálu donorů vodíku:
Donor + H2O2 → Oxidovaný donor + 2 H2O
HRP oxiduje různé substráty (viz tabulka 1):
• Chromogenní
• Chemiluminiscenční (jako je luminol nebo isoluminol)
• Fluorogenní (jako je tyramin, kyselina homovanilová nebo kyselina 4-hydroxyfenyloctová)
HRP je jednořetězcový polypeptid, který obsahuje čtyři disulfidové můstky.HRP je glykoprotein, který obsahuje 18 % sacharidů.Sacharidová kompozice se skládá z galaktózy, arabinózy, xylózy, fukózy, manózy, mannosaminu a galaktosaminu, v závislosti na specifickém izozymu.

HRP je široce používaná značka pro imunoglobuliny v mnoha různých imunochemických aplikacích, včetně imunoblotu, imunohistochemie a ELISA.HRP může být konjugován s protilátkami několika různými metodami, včetně glutaraldehydu, oxidace jodistanem, přes disulfidové vazby a také přes amino a thiolem řízené crosslinkery.HRP je nejžádanější značka pro protilátky, protože je nejmenší a nejstabilnější ze tří nejoblíbenějších enzymových značek (peroxidáza, β-galaktosidáza, alkalická fosfatáza) a její glykosylace vede k nižší nespecifické vazbě.Byl publikován přehled metod konjugace glutaraldehydu a jodistanu.

Peroxidáza se také používá pro stanovení glukózy4 a peroxidů v roztoku.Několik publikací, 6-24 diplomových prací, 25-29 a disertačních prací 30-46 citovalo použití P8375 ve svých výzkumných protokolech.