Alkalická fosfatáza (ALP)
Popis
Alkalická fosfatáza je odvozena z rekombinantního kmene E. coli, který nese gen TAB5.Enzym katalyzuje defosforylaci 5´ a 3´ konců DNA a RNA fosfomonoesterů.Také hydrolyzuje ribózu, stejně jako deoxyribonukleosidtrifosfáty (NTP a dNTP).TAB5 Alkalická fosfatáza působí na 5´ vyčnívající, 5´ zapuštěné a tupé konce.Fosfatáza může být použita v mnoha aplikacích molekulární biologie, jako je klonování nebo značení konců sondy k odstranění fosforylovaných konců DNA nebo RNA.V klonovacích experimentech defosforylace zabraňuje samoligaci linearizované plazmidové DNA.Může také degradovat neinkorporované dNTP v PCR reakcích za účelem přípravy templátu pro sekvenování DNA.Enzym je zcela a nevratně inaktivován zahřátím na 70 °C po dobu 5 minut, takže odstranění fosfatázy před ligací nebo koncovým značením není nutné.
Používání
1.Alkalická fosfatáza navázaná na proteiny (protilátky, streptavidin atd.) může specificky identifikovat cílové molekuly a může být použita v ELISA, WB a histochemické detekci;
2. Alkalickou fosfatázu lze použít k defosforizaci 5'-konce DNA nebo RNA, aby se zabránilo samovazbě;
3. Výše uvedená defosforylovaná DNA nebo RNA může být značena radioaktivně značenými fosfáty (prostřednictvím T4 polynukleotidkinázy)
Chemická struktura
Specifikace
Testovací položky | Specifikace |
Enzymová aktivita | 5U/μL |
Endonukleázová aktivita | Nezjištěno |
Exonukleázová aktivita | Nezjištěno |
Nicking aktivita | Nezjištěno |
Aktivita RNázy | Nezjištěno |
DNA E.coli | ≤1 kopie/5U |
endotoxin | LAL-Test, ≤10EU/mg |
Čistota | ≥95 % |
Doprava a skladování
Přeprava:Okolní
Úložný prostor :Skladujte při 2-8°C
Doporučený opakovaný testŽivot:2 roky