2×PCR Super Mix (s barvivem)
2× PCR Master Mix obsahuje Taq DNA polymerázu, dNTP a další komponenty požadované pro PCR.Master Mix je stabilní po dobu 3 měsíců při 4 °C s našimi přizpůsobenými stabilizátory.Roztok předsměsi je optimalizován pro konvenční PCR a připraven k použití přidáním templátu DNA a primerů.Produkty PCR lze nanést přímo pro elektroforézu s předem naplněným barvivem bromfenolovou modří.Amplifikované produkty obsahují 3'-dA protruzi a mohou být snadno klonovány do T vektoru.2×PCR Master Mix zjednodušuje postup PCR a snižuje kontaminaci.
Podmínky skladování
Produkty by měly být skladovány při -25℃~-15℃ po dobu 2 let.
Specifikace
| Věrnost (vs. Taq) | 1× |
| Hot Start | No |
| Převis | 3'-A |
| Polymeráza | Taq DNA polymeráza |
| Formát reakce | SuperMix nebo Master Mix |
| Rychlost reakce | Standard |
| Typ produktu | PCR Master Mix (2x) |
Instrukce
1.Reakční systém
| Komponenty | Hlasitost(μL) |
| DNA šablony | Vhodný |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L） | 2 |
| 2× PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | do 50 |
2.Amplifikační protokol
| Cyklujte kroky | Teplota (°C) | Čas | Cykly |
| Počáteční denaturace | 94 | 5 minut | 1 |
| Denaturace | 94 | 30 sec | 35 |
| Žíhání | 50-60 | 30 sec | |
| Rozšíření | 72 | 30-60 s/kb | |
| Konečné prodloužení | 72 | 10 min | 1 |
Poznámka:
1) Použití šablony: 50-200 ng genomové DNA;0,1-10 ng plazmidové DNA.
2) Mg2+koncentrace: Tento produkt obsahuje 3 mM MgCl2, vhodný pro většinu PCR reakcí.
3) Teplota žíhání: Podívejte se prosím na teoretickou hodnotu Tm primerů.Teplotu žíhání lze nastavit o 2-5 °C nižší, než je teoretická hodnota primeru.
4) Doba prodloužení: Pro molekulární identifikaci se doporučuje 30 s/kb.Pro klonování genů se doporučuje 60 s/kb.
Poznámky
1.Produkty PCR s 2× PCR Master Mix nejsou vhodné pro elektroforézu na polyakrylamidovém gelu.
2.Pro vaši bezpečnost a zdraví používejte při provozu laboratorní pláště a jednorázové rukavice.
3.Používá se POUZE pro výzkumné účely!
