Bst 2.0 DNA polymeráza (bez glycerolu, vysoká hustota)
Bst DNA polymeráza V2 je odvozena z Bacillus stearothermophilus DNA polymerázy I, která má aktivitu 5′→3′ DNA polymerázy a silnou aktivitu nahrazující řetězec, ale žádnou aktivitu 5′→3′ exonukleázy.Bst DNA Polymerase V2 je ideálně vhodná pro vytěsňování vláken, izotermickou amplifikaci LAMP (Loop mediated isothermal amplification) a rychlé sekvenování.Tato Bst DNA polymeráza V2 je schopna inhibovat aktivitu DNA polymerázy při pokojové teplotě, takže může být provozována a reakční systém může být formulován při pokojové teplotě, což zabraňuje nespecifické amplifikaci a zlepšuje účinnost reakce, a tato verze může být lyofilizován.Navíc je schopen uvolňovat svou aktivitu při zvýšených teplotách, čímž eliminuje potřebu samostatného aktivačního kroku.
Komponenty
| Komponent | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA polymeráza V2 (bez glycerolu) (32 U/μL) | 0,05 ml | 0,25 ml | 2,5 ml |
| 10×HC Bst V2 Buffer | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 3×10 ml |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 2×10 ml |
Aplikace
1.Izotermické zesílení LAMP
2.Reakce jednoduchého vytěsnění řetězce DNA
3.Vysoké sekvenování genu GC
4.Sekvenování DNA na úrovni nanogramů.
Skladovací stav
Přepravujte při teplotě 0°C a skladujte při -25°C~-15°C.
Definice jednotky
Jedna jednotka je definována jako množství enzymu, které inkorporuje 25 nmol dNTP do materiálu nerozpustného v kyselině za 30 minut při 65 °C.
LAMP Reakce
| Komponenty | 25 μLSystém |
| 10×HC Bst V2 Buffer | 2,5 μl |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 μl |
| dNTP (každý 10 mM) | 3,5 μl |
| SYTO™ 16 zelená (25×)a | 1,0 μl |
| Základní směsb | 6 μl |
| Bst DNA Polymerase V2 (bez glycerolu) (32 U/ul) | 0,25 μl |
| Šablona | × μL |
| ddH20 | Až 25 μl |
Poznámky:
1) a.SYTOTM 16 Green (25×): Podle potřeby experimentu lze jako náhradu použít i jiná barviva;
2) b.Směs primerů: získaná smícháním 20 uM FIP, 20 uM BIP, 2,5 uM F3, 2,5 uM B3, 5 uM LF, 5 uM LB a dalších objemů.
Reakce a stav
1 × HC Bst V2 Buffer, inkubační teplota je mezi 60 °C a 65 °C.
Tepelná inaktivace
80 °C, 20 minut.
