Uvolňovací činidlo vzorku
Sample Release Reagent je pro molekulární POCT diagnostické scénáře.Pro dva systémy přímé amplifikace LAMP a přímé amplifikace PCR není potřeba extrakce nukleové kyseliny.Surový lyzát vzorku může být přímo amplifikován, cílový gen může být přesně detekován, doba detekce vzorku může být dále zkrácena, což dokonale odpovídá aplikačním požadavkům molekulárního POCT.Je vhodný pro výtěry z nosu, výtěry z krku a další typy vzorků.Zpracované vzorky lze přímo použít pro fluorescenční kvantitativní PCR v reálném čase nebo detekci LAMP a lze dosáhnout stejných výsledků jako konvenčními extrakčními metodami bez komplikovaných operací extrakce nukleových kyselin.
Podmínky skladování
Přepravujte a skladujte při pokojové teplotě.
Kontrola kvality
Funkční detekce – kvantitativní qPCR: Byl amplifikován 800μl systém reagencie pro uvolnění vzorku
s 1000 kopiemi nového pseudoviru, jedním vzorkem výtěru z nosu, výsledkem jsou podobné amplifikační křivky aHodnoty ΔCt v rozmezí ± 0,5 Ct.
Experimentální postupres
1. Vezměte 800 μl činidla pro uvolnění vzorků a rozprostřete lyzační roztok do 1,5 ml vzorkovací zkumavky
2. Vezměte nosní výtěr nebo výtěr z krku s výtěrem; Postup odběru výtěru z nosu: vezměte sterilní výtěr a vložte jej do nosních dírek, pomalu posuňte do hloubky asi 1,5 cm, jemně 4krát otáčejte proti nosní sliznici po dobu delší než 15 sekund , poté zopakujte stejnou operaci na druhé nosní dutině se stejným tamponem. Postup odběru tamponu z krku: vezměte sterilní tampon a 3x rychle rychle otřete hltanové mandle a zadní stěnu hltanu.
3.Tampón ihned vložte do vzorkovací zkumavky.Hlava tamponu by se měla otáčet a míchat ve skladovacím roztoku po dobu alespoň 30 sekund, aby se zajistilo, že se vzorek ve vzorkovací zkumavce úplně eluuje.
4. Inkubace při pokojové teplotě (20~ 25°C) po dobu 1 minuty, příprava lyzačního pufru je dokončena.
5. Jak 25μl systémová RT-PCR, tak RT-LAMP byly kompatibilní s 10μl množstvím přidaného templátu pro detekční experimenty.
Poznámky
1. Minimální množství přímého lyzátu vzorku odpovídající jednomu tamponu lze upravit na 400 μl, které lze upravit podle potřeb testování.
2. Jakmile je vzorek zpracován činidlem uvolňujícím vzorek, doporučuje se provést další fázi testu co nejdříve, čekací doba je nejlépe kratší než 1 hodina.
3. pH lyzátu vzorku je kyselé a detekční systém musí mít určitý pufr.Je vhodný pro většinu PCR, RT-PCR a fluorescenční detekci LAMP s pH pufrem, ale není vhodný pro kolorimetrickou detekci LAMP bez pufru.
