Ultra Nuclease GMP-grade
Kat. č.: HC2016A
UltraNuclease GMP-grade je exprimován a purifikován v Escherichia coli (E. coli) genetickým inženýrstvím a připraven v prostředí GMP.Může snížit viskozitu buněčného supernatantu a buněčného lyzátu ve vědeckém výzkumu, zvýšit účinnost čištění proteinů a zlepšit výzkum funkčních proteinů.Produkt může také redukovat zbytky hostitelské nukleové kyseliny na pg-grade, čímž zlepšuje výkon a bezpečnost biologických produktů aplikací včetně purifikace virů, výroby vakcín a farmaceutické výroby proteinů/polysacharidů.Kromě toho může být produkt také aplikován k prevenci shlukování lidských periferních krevních mononukleárních buněk (PBMC) při buněčné terapii a vývoji vakcín.
UltraNuclease se dodává ve formě sterilizovaného činidla, eluovaného v pufru (20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50 % glycerin), se vzhledem bezbarvé, průhledné kapaliny.Tento produkt se vyrábí podle požadavků procesu GMP a dodává se v kapalné formě.
Komponenty
UltraNuclease GMP-grade (250 U/μL)
Podmínky skladování
Výrobek je dodáván se suchým ledem a může být skladován při teplotě -25°C~-15°C po dobu dvou let.
Pokud je produkt otevřen a byl skladován při 4 °C déle než týden, doporučujeme filtrovatpřípravek, aby se zabránilo mikrobiální kontaminaci.
Specifikace
| Hostitel výrazu | Rekombinantní E. coli s genem pro ultranukleázu |
| Molekulární váha | 26,5 kDa |
| soelektrický bod | 6,85 |
| Čistota | ≥99 % (SDS-PAGE) |
| Vyrovnávací paměť úložiště | 20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50 % glycerin |
|
Definice jednotky | Definice jedné jednotky aktivity (U) je množství použitého enzymuzměnit hodnotu absorpce ΔA260 o 1,0 za 30 minut v 2,625 mlreakční systém při 37 °C s pH 8,0 (ekvivalentní úplnému strávení37 μg DNA spermatu lososa na oligonukleotidy). |
Instrukce
1. Ukázka Sbírka
Adherentní buňky: odstraňte médium, promyjte buňky PBS a odstraňte supernatant.
Suspenzní buňky: shromážděte buňky centrifugací, promyjte buňky PBS, centrifugujte při 6 000ot./min. po dobu 10 min., seberte peletu.
Escherichia coli: seberte bakterie odstředěním, jednou promyjte PBS, odstřeďte při 8 000rpm po dobu 5 minut a shromážděte peletu.
2. Ošetření vzorku
Odebrané buněčné pelety ošetřete lyzačním pufrem v poměru hmotnost(g) k objemu (ml)1:(10-20), nebo mechanickými či chemickými metodami na ledu nebo při pokojové teplotě (1g buněčné pelety obsahuje cca
109 buněk).
3. Enzymová léčba
Přidejte 1-5 mM MgCl do reakčního systému a upravte pH na 8-9.
Přidejte UltraNuclease v poměru 250 jednotek na strávení 1 g buněčných pelet, inkubujte při 37 °C po dobu delší než 30 minut.Vyberte si prosím ve formuláři „Doporučená doba reakce“.trvání léčby.
4. Supernatant Sbírka
Centrifugujte při 12 000 otáčkách za minutu po dobu 30 minut a shromážděte supernatant.
Poznámka: Pokud je roztok kyselý nebo zásaditý, nebo obsahuje vysoké koncentrace soli, detergentů, popřdenaturanty, zvyšte prosím dávkování enzymu nebo odpovídajícím způsobem prodlužte dobu ošetření.
Doporučené reakční podmínkyons
| Parametr | Optimální stav | Efektivní kondicionér |
| Mg2+koncentrace | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Teplota | 37℃ | 0-42 ℃ |
| Koncentrace DTT | 0-100 mM | >0 mM |
| Koncentrace merkaptoethanolu | 0-100 mM | >0 mM |
| Monovalentní kationtová koncentrace | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Fosfát lon Koncentrace | 0-10 mM | 0-100 mM |
Doporučeno Reakce Čas (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8,0)
| Množství ultranukleázy (konečná koncentrace) | Reakční čas |
| 0,25 U/ml | >10 h |
| 2,5 U/ml | >4h |
| 25 U/ml | 30 min |
Poznámky:
Noste prosím nezbytné OOP, jako je laboratorní plášť a rukavice, abyste zajistili své zdraví a bezpečnost!
