2×PCR Master Mix (bez barviva)
PCR Master Mix je druh konvenčního PCR předem smíchaného roztoku, který je připraven k použití, včetně Taq DNA polymerázy, dNTP mix MgCl2 a optimalizovaného pufru.Během reakce lze pro amplifikaci přidat pouze primer a templát, což značně zjednodušuje operační kroky experimentu.Tento produkt obsahuje vynikající stabilizátory a může být skladován po dobu 3 měsíců při 4 °C.PCR produkt má 3'-dA protruzi a může být snadno klonován do T vektoru.
Podmínky skladování
Výrobek by měl být skladován při teplotě -25℃~ -15℃ po dobu dvou let.
Specifikace
| Věrnost (vs. Taq) | 1× |
| Hot Start | No |
| Převis | 3'-A |
| Polymeráza | Taq DNA polymeráza |
| Formát reakce | SuperMix nebo Master Mix |
| Rychlost reakce | Standard |
| Typ produktu | PCR Master Mix (2×) |
Instrukce
1.Reakční systém
| Komponenty | Velikost (μL) |
| DNA šablony | Vhodný |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | Do 50 |
2.Amplifikační protokol
| Cyklujte kroky | Teplota (°C) | Čas | Cykly |
| Předdenaturace | 94 ℃ | 5 minut | 1 |
| Denaturace | 94 ℃ | 30 sec | 35 |
| Žíhání | 50-60 ℃ | 30 sec | |
| Rozšíření | 72 ℃ | 30-60 s/kb | |
| Konečné prodloužení | 72 ℃ | 10 minut | 1 |
Poznámky:
1) Použití šablony: 50-200 ng genomové DNA;0,1-10 ng plazmidové DNA.
2) Mg2+koncentrace: Tento produkt obsahuje 3 mM MgCl2 vhodného pro většinu PCR reakcí.
3) Teplota žíhání: Podívejte se prosím na teoretickou hodnotu Tm primerů.Teplotu žíhání lze nastavit o 2-5 ℃ nižší, než je teoretická hodnota primeru.
4) Doba prodloužení: Pro molekulární identifikaci se doporučuje 30 s/kb.Pro klonování genů, 60s/kb se doporučuje.
Poznámky
1.Pro vaši bezpečnost a zdraví používejte při provozu laboratorní pláště a jednorázové rukavice.
2.Pouze pro výzkumné účely!
