Souprava pro extrakci virové DNA/RNA
Tato souprava je vhodná pro rychlou extrakci vysoce čisté virové DNA/RNA ze vzorků, jako jsou výtěry z nosohltanu, výtěry z prostředí, supernatanty buněčných kultur a supernatanty tkáňových homogenátů.Souprava je založena na technologii čištění membrány oxidu křemičitého, která eliminuje potřebu použití organických rozpouštědel fenol/chloroform nebo časově náročné srážení alkoholem k extrakci virové DNA/RNA vysoké kvality.Získané nukleové kyseliny jsou bez nečistot a jsou připraveny k použití v následných experimentech, jako je reverzní transkripce, PCR, RT-PCR, PCR v reálném čase, sekvenování nové generace (NGS) a Northern blot.
Podmínky skladování
Skladujte při 15 ~ 25 ℃ a přepravujte při pokojové teplotě
Komponenty
| Komponenty | 100 RXNS |
| Buffer VL | 50 ml |
| Vyrovnávací paměť RW | 120 ml |
| ddH20 bez RNázy | 6 ml |
| Sloupce FastPure RNA | 100 |
| Sběrné zkumavky (2ml) | 100 |
| Sběrné zkumavky bez RNázy (1,5 ml) | 100 |
Vyrovnávací paměť VL:Poskytněte prostředí pro lýzu a vazbu.
Vyrovnávací paměť RW:Odstraňte zbytky bílkovin a jiných nečistot.
ddH2O bez RNázy:Vymyjte DNA/RNA z membrány v koloně.
FastPure RNA sloupce:Specificky adsorbují DNA/RNA.
Sběrné zkumavky 2 ml:Shromážděte filtrát.
Sběrné zkumavky bez RNázy 1,5 ml:Odeberte DNA/RNA.
Aplikace
Výtěry z nosohltanu, výtěry z prostředí, supernatanty buněčných kultur a supernatanty tkáňových homogenátů.
Samopřipravený Materials
Pipetové špičky bez RNázy, 1,5 ml centrifugační zkumavky bez RNázy, centrifuga, vortex mixer a pipety.
Experimentální proces
Proveďte všechny následující kroky ve skříni biologické bezpečnosti.
1. Přidejte 200 μl vzorku do centrifugační zkumavky bez RNázy (v případě nedostatečného vzorku doplňte PBS nebo 0,9% NaCl), přidejte 500 μl pufru VL, dobře promíchejte vortexováním po dobu 15 – 30 sekund a centrifugujte krátce, aby se směs shromáždila na dně zkumavky.
2. Umístěte kolony FastPure RNA do sběrných zkumavek 2 ml.Přeneste směs z kroku 1 do kolon FastPure RNA, centrifugujte při 12 000 otáčkách za minutu (13 400 x g) po dobu 1 minuty a filtrát zlikvidujte.
3. Přidejte 600 μl pufru RW do kolon FastPure RNA, centrifugujte při 12 000 otáčkách za minutu (13 400 × g) po dobu 30 sekund a filtrát zlikvidujte.
4. Opakujte krok 3.
5. Centrifugujte prázdnou kolonu při 12 000 otáčkách za minutu (13 400 × g) po dobu 2 minut.
6. Opatrně přeneste kolony FastPure RNA do nových odběrových zkumavek bez RNázy 1,5 ml (dodané v soupravě) a přidejte 30 – 50 μl ddH2O bez RNázy do středu membrány, aniž byste se dotkli kolony.Nechte stát 1 minutu při pokojové teplotě a centrifugujte při 12 000 ot./min (13 400 × g) 1 minutu.
7. Zlikvidujte kolony FastPure RNA.DNA/RNA může být použita přímo pro následné testy nebo může být skladována při -30~ -15 °C po krátkou dobu nebo -85 ~-65 °C po delší dobu.
Poznámky
Pouze pro výzkumné použití.Není určeno pro diagnostické postupy.
1. Vzorky předem ekvilibrujte na pokojovou teplotu.
2. Viry jsou vysoce infekční.Před experimentem zajistěte, aby byla přijata všechna nezbytná bezpečnostní opatření.
3. Vyhněte se opakovanému zmrazování a rozmrazování vzorku, protože to může vést k degradaci nebo snížení výtěžku extrahované virové DNA/RNA.
4. Samostatně připravené vybavení zahrnuje špičky pipet bez RNázy, 1,5 ml centrifugační zkumavky bez RNázy, odstředivku, vortexový mixér a pipety.
5. Při používání soupravy noste laboratorní plášť, jednorázové latexové rukavice a jednorázovou masku a používejte spotřební materiál bez obsahu RNázy, abyste minimalizovali riziko kontaminace RNázou.
6. Všechny kroky provádějte při pokojové teplotě, pokud není uvedeno jinak.
Mechanismus a pracovní postup
